本试剂盒采用直接竞争ELISA方法批量检测禽白血病病毒抗原。

二、用途

批量检测蛋清、泄殖腔式子、肝脏、病毒培养液等一批中禽白血病病毒，检测结果可用于ALV感染的辅助诊断。

三、所需材料

仪器：微孔板酶标仪450 nm/630 nm、振荡器、离心机、、离心管（5 mL, 50 mL）

微量移液器：单道 1µL～10 µL、10 µL～100µL

多道 50µL～300µL

试剂：去离子水

五、 试剂盒组成

六、溶液配制

配液1: 洗涤工作液

   用去离子水将20×浓缩洗涤液按1 : 19体积比进行稀释，用于酶标板的洗涤，洗涤工作液在4℃环境可保存一个月，用前一天取出回温。

 配液2: 1 ×样品稀释液        

   用去离子水将2 ×样品稀释液按1:1体积比进行稀释。配好的1 ×样品稀释液在4℃环境可保存一个月，用前一天取出回温。

七、样本前处理                                                   

样本处理前须知：

① 处理完的样品应及时进行下步检测，实验中必须使用一次性吸头，吸取不同试剂时要更换吸头。

② 样本数目超过8个时推荐使用排枪加样。

样本处理：

①蛋清取全蛋，破碎后取蛋清，,置-20℃以下冻融1次，用微量移液器吸取蛋清直接进行检测。

②泄殖腔拭子用无菌棉签于待检鸡只泄殖腔取样后，放入0.5ml 1×样品稀释液中，置-20℃以下冻融1次，剧烈震荡1分钟，挤出棉签中的液体，弃棉签。以5000r/min离心5分钟，取上清直接进行检测。

③病毒培养液，取病毒培养液以8000r/min离心10分钟，取上清直接进行检测。

④肝脏等组织，取约2g加入0.5ml 1×样品稀释液，研磨破碎，置-20℃以下冻融1次，以5000r/min离心5分钟，取上清直接进行检测。

八、 酶标免疫测定程序

①将所有所需试剂从冷藏环境中取出，待其完全回升至室温(20~25℃)后方可使用。注意每种液体试剂使用前均须摇匀。

② 按阳性对照和样品双孔平行的数量使用微孔。

包被板上对照品和待测样品添加如下所示：

(注：P表示阳性对照品;N表示阴性对照品；S1、S2、S3、S4等表示待检样品)